島津LC20A液相色譜儀、快速、靈敏
島津LC20A液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有、快速、靈敏等特點(diǎn)。
液相色譜儀是依靠色譜柱進(jìn)行分離的。研究證明:物質(zhì)的色譜過(guò)程是指物質(zhì)分子在相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相(液相和固相)中分配“平衡”的過(guò)程。液相色譜是以具有吸附性質(zhì)的硅膠顆粒為固定相,各種洗脫液為流動(dòng)相。當(dāng)液體樣品在載體流動(dòng)相的推動(dòng)下,在液-固兩相間作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),由于各組分在兩相中的分配系數(shù)(K)不同,則使各自的移動(dòng)速度不同,即產(chǎn)生差速遷移。各組分在兩相間經(jīng)過(guò)多次分配,從而達(dá)到使混合物分離的目的。
在液相色譜儀中保留值定性的方法主要是用直接與已知標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)照的方法。當(dāng)未知峰的保留值(t'R或V'R)與某一已知標(biāo)準(zhǔn)物*相同時(shí),則未知峰可能與此已知標(biāo)準(zhǔn)物是同一物質(zhì),特別是在改變色譜柱或改變洗脫液的組成時(shí),未知峰的保留值與已知標(biāo)準(zhǔn)物的保留值仍能*相同,則可以基本上認(rèn)定未知峰與標(biāo)準(zhǔn)物是同一物質(zhì)。
島津LC20A液相色譜儀在利用保留值數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)和定性分析時(shí)要特別注意到:由于液相色譜柱的填柱技術(shù)較復(fù)雜,液相色譜儀所使用的色譜柱的重現(xiàn)性目前還很不理想,即使是同一批號(hào)的柱子,重現(xiàn)性也不一致,這就使得使用保留值數(shù)據(jù)進(jìn)行分析受到限制。因此,目前保留值數(shù)據(jù)只能作為定性分析的參考??梢愿鶕?jù)這些數(shù)據(jù)和對(duì)樣品的了解來(lái)選用已知標(biāo)準(zhǔn)物,再用這些已知標(biāo)準(zhǔn)物與未知物在同一色譜條件下直接進(jìn)行對(duì)比。
簡(jiǎn)單的保留值定性方法是將已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加到樣品中去,若使某一峰增高,而且在改變色譜柱或洗脫液的組成后,仍能使這個(gè)峰增高,則可基本認(rèn)定這個(gè)峰所代表的組分與已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為同一物質(zhì)。
目前一些液相色譜儀儀器配備了三維圖譜檢測(cè)器,如二極管陣列檢測(cè)器,在進(jìn)行未知組分與已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比對(duì)時(shí),除了比較保留時(shí)間外,還可以比較兩個(gè)峰的立體圖形。如在使用二極管陣列檢測(cè)器時(shí),除了比較未知組分與已知標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時(shí)間外,還可比較兩者的紫外光譜圖,如果保留時(shí)間一樣,兩者的紫外光譜圖也*一樣,則可基本上認(rèn)定兩者是同一物質(zhì);若保留時(shí)間雖一樣,但兩者的紫外光譜圖有較大差別,則兩者不是同一物質(zhì)。這種利用三維圖譜比較對(duì)照的方法大大提高了保留值比較定性方法的準(zhǔn)確性。
島津LC20A液相色譜儀美國(guó)Bio-Rad公司的血藥分析儀(Remeeli)就是依靠三維圖譜的綜合數(shù)據(jù)的分析來(lái)鑒別未知藥物的。