液相色譜主要用于對(duì)吸收紫外線的液態(tài)有機(jī)物(不飽和有機(jī)物)進(jìn)行定性、定量分析和純度分析,定性,是保留時(shí)間的特征峰值。沒(méi)有辦法分析物質(zhì)結(jié)構(gòu),但如果已知的物質(zhì)是x,則要測(cè)量的物質(zhì)可以與x標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較。液相色譜測(cè)定表明,該物質(zhì)的停留時(shí)間相同,測(cè)定結(jié)果表明,該物質(zhì)主要用于測(cè)試中的色譜鑒定。
液相色譜儀定量,即濃度與峰值面積成正比。要測(cè)量的材料的純度是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的。主要用于內(nèi)容的確定。純度分析,這是以波長(zhǎng)為基礎(chǔ)的。物質(zhì)的純度大致由樣品在特定波長(zhǎng)注入時(shí)主成分色譜和雜質(zhì)色譜的峰值面積決定,主要用于測(cè)定相關(guān)物質(zhì)。
高效液相色譜進(jìn)樣的濃度沒(méi)有確切的濃度因?yàn)闈舛仁怯稍S多因素決定的不是的。
液相色譜的濃度與以下因素有關(guān):
1.探測(cè)器探測(cè)能力。紫外、蒸發(fā)、差示和熒光探測(cè)器的探測(cè)能力不同。其中,紫外探測(cè)器的靈敏度、光源能量、循環(huán)電池的通透性和清潔度都決定了紫外探測(cè)器的檢測(cè)能力。液相色譜儀
2.物質(zhì)響應(yīng)值。同一檢測(cè)器下檢測(cè)到的不同物質(zhì)的信號(hào)大小不同。同一濃度為1mg/ml,a、b物質(zhì)的響應(yīng)值可相差2倍、10倍甚至100倍。
3.液相色譜HPLC中紫外檢測(cè)波長(zhǎng)同一物質(zhì)在不同紫外波長(zhǎng)下的響應(yīng)值不同這與該物質(zhì)在該波長(zhǎng)下的吸收值有關(guān).
4.高效色譜柱的載量,有時(shí)物質(zhì)濃度過(guò)高超過(guò)色譜柱的負(fù)荷范圍,會(huì)形成“平頭峰”或峰分叉,肩峰,對(duì)稱性差等分離問(wèn)題。
5.液相色譜儀按方法驗(yàn)證事實(shí)上,應(yīng)用于常規(guī)測(cè)試方法的zui高濃度應(yīng)通過(guò)一系列方法學(xué)驗(yàn)證來(lái)驗(yàn)證,以證明濃度的合理性和可行性方法學(xué)驗(yàn)證中zui高濃度主要需要通過(guò)線性試驗(yàn)、回收率試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、專(zhuān)屬性試驗(yàn)和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。